基于单细胞测序技术的人类胚胎发育早期基因表达调控网络研究

课题背景:

人类胚胎发育是一个复杂而神秘的过程,涉及多种细胞类型的分化和组织形成。单细胞测序技术(single-cell sequencing, scRNA-seq)是一种能够在单个细胞水平上揭示基因表达差异和调控网络的技术,为人类胚胎发育的研究提供了新的视角和工具。近年来,利用单细胞测序技术,研究者们已经构建了人类胚胎发育早期(从受精卵到囊胚期)的基因表达图谱 ,并发现了一些重要的基因和信号通路在细胞分化和组织形成中的作用 。然而,人类胚胎发育早期的基因表达调控网络仍然不够清楚,需要进一步的研究。

课题简介:本课题旨在利用单细胞测序技术,分析人类胚胎发育早期(从受精卵到囊胚期)的基因表达调控网络,探索不同细胞类型之间的相互作用和转录因子的功能。

本课题将采用以下方法:

1. 从公开数据库中获取人类胚胎发育早期的单细胞测序数据 ,并进行质量控制、归一化、批次校正等预处理步骤。
2. 利用聚类分析、主成分分析、t-SNE等降维方法,对单细胞数据进行细胞类型鉴定和可视化。
3. 利用差异表达分析、富集分析、共表达网络分析等方法,筛选出在不同细胞类型中具有显著差异的基因,并分析其功能和通路。
4. 利用转录因子结合位点预测、转录因子活性推断、转录调控网络重构等方法,识别出在人类胚胎发育早期起关键作用的转录因子,并分析其调控网络。
课题内容:
第一阶段:数据获取和预处理。从公开数据库中下载人类胚胎发育早期的单细胞测序数据,并使用R语言和Bioconductor包进行质量控制、归一化、批次校正等预处理步骤,得到可用于后续分析的数据矩阵。
第二阶段:细胞类型鉴定和可视化。使用R语言和Seurat包进行聚类分析、主成分分析、t-SNE等降维方法,对单细胞数据进行细胞类型鉴定,并使用ggplot2包进行可视化,展示不同细胞类型在二维或三维空间中的分布情况。
第三阶段:差异表达基因筛选和功能分析。使用R语言和limma包进行差异表达分析,筛选出在不同细胞类型中具有显著差异的基因,并使用R语言和clusterProfiler包进行富集分析,分析这些基因在生物过程、分子功能和通路中的作用。同时,使用R语言和WGCNA包进行共表达网络分析,构建不同细胞类型的基因共表达网络,并识别出网络中的关键模块和基因。
第四阶段:转录因子识别和调控网络分析。使用R语言和HOMER包进行转录因子结合位点预测,预测出差异表达基因的上游转录因子,并使用R语言和SCENIC包进行转录因子活性推断,推断出在不同细胞类型中具有不同活性的转录因子。最后,使用R语言和igraph包进行转录调控网络重构,重构出人类胚胎发育早期的转录调控网络,并分析其拓扑结构和功能模块。
课题创新点:
1. 本课题是基于单细胞测序技术的人类胚胎发育早期基因表达调控网络研究,是目前较为前沿和热门的研究方向,具有较高的学术价值和社会意义。
2. 本课题采用了多种数据分析方法,从不同角度和层次揭示了人类胚胎发育早期的基因表达差异和调控机制,为理解人类胚胎发育的分子基础提供了新的视角和工具。

3. 本课题识别出了在人类胚胎发育早期起关键作用的转录因子和调控网络,为揭示人类胚胎发育的调控逻辑和设计人类胚胎发育的干预策略提供了新的线索和候选靶点。

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